盲腸結(jié)扎穿孔以及電針刺激
??1. SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周
??2. 水合氯醛麻醉，然后打開腹部，對盲腸用生銹的注射器針頭刺穿
??3. 術(shù)后縫合，觀察動物狀態(tài)，并對電針組實驗動物進行電針治療
??4. 在6h、12h分別處死部分動物取血
腫瘤模型（皮下種植結(jié)腸癌/肝癌/肺癌模型）
??1. 購買4~6周的裸鼠，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周
??2. 前肢腋下部位附近皮下種植結(jié)腸癌細(xì)胞，濃度1X107個/100ul
??3. 注意無菌，然后飼養(yǎng)觀察
??4. 稱重和實驗觀察和記錄
??5. 一般實驗需要4周左右
大鼠心梗模型
??1. 購買4-6周的大鼠，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周
??2. 進行大鼠冠脈結(jié)扎，于末次給藥后1h，在戊巴比妥鈉腹腔麻醉下仰位固定于手術(shù)臺，自左側(cè)3-4肋間開胸，暴露心臟，于肺 動脈圓錐及左心房間找出冠脈左前降支,立即結(jié)扎冠脈，將心臟送回胸腔，并擠出胸腔內(nèi)血液和氣體，迅速關(guān)閉胸腔，開胸時間不超過30s。術(shù)后5天連續(xù)注射青霉素鈉
??3. 觀察開胸后、縫針后、結(jié)扎后、關(guān)胸后心電圖的變化
??4. 合格后的大鼠在4周及6周后復(fù)查心電圖
自體靜脈移植
??1. 選新西蘭大耳兔，戊巴比妥鈉按照體重麻醉
??2. 切開頸部皮膚，鈍性分離皮下組織；選取大小和直徑同要移植部位的血管相同的靜脈血管，先結(jié)扎該靜脈的兩端
??3. 剪下該靜脈，用滅菌生理鹽水沖洗干凈，備用
??4. 將要移植部位的動脈血管，同周圍組織分離，兩端用動脈夾夾閉，然后剪下，把斷端清洗干凈；把前面的靜脈縫合到該動脈斷端。先稍微放開遠心端的動脈夾，檢查是否有滲血，確認(rèn)無滲血后，同樣 方法檢查另外一端
??5. 分層縫合，在關(guān)閉皮膚前，進行嚴(yán)格清潔和抗菌處理，然后縫合皮膚
??6. 術(shù)后兩周內(nèi)靜脈注射適量的肝素抗凝，隨時觀察實驗動物的狀態(tài)，及時處理；根據(jù)客戶自己確定實驗周期，準(zhǔn)備動物和實驗器材至少需要一周
貼劑動物體外實驗
??1. 實驗分組及處理
??2. 用藥24h后取下，用溫水洗脫
??3. 分別于1h，24h，48h，72h肉眼觀察局部有無紅斑和水腫。然后連續(xù)用藥7d，每天貼敷時間為12h，觀察停藥1h，24h，48h，72h后局部紅斑、水腫情況，以及是否有色素沉著、出血點、皮膚粗糙或皮膚菲薄等情況，記錄發(fā)生和消退時間
皮膚急性毒性試驗
??1. 實驗分組及處理
??2. 用藥24h后取下，用溫水洗脫
??3. 分別于1h，24h，48h，72h至第7天，每天觀察并記錄動物的體重、皮毛光澤、飲食、眼和粘膜的變化，呼吸中樞、神經(jīng)系統(tǒng)、四肢活動和死亡情況
??4. 并于7天后處死大鼠，解剖觀察其心、肝、肺、腎、卵巢、子宮等臟器有無異常變化，詳細(xì)記錄任何組織或器官出現(xiàn)的體積、顏色、質(zhì)地的改變
??5. 主要臟器稱重，計算臟器指數(shù)
皮膚過敏試驗
??1. 實驗分組及處理
??2. 脫毛24h后，取痛經(jīng)巴布貼貼敷在SD大鼠脫毛區(qū)，并以無刺激膠布固定，持續(xù)6h，第7天和第14天以同樣方法重復(fù)一次
??3. 于末次給痛經(jīng)巴布貼巴布劑致敏后14d，將痛經(jīng)巴布貼貼敷于SD大鼠脫毛區(qū)，賦形劑貼對照組與陽性對照組方法同上
??4. 6h后去掉受試藥物，即刻觀察，并于24h，48h，72h再觀察有無過敏反應(yīng)，按表一記錄個時間過敏反應(yīng)分值，同時注意觀察SD大鼠是否有哮喘、站立不穩(wěn)或休克等嚴(yán)重的全身性過敏反應(yīng)，計算致敏發(fā)生率
藥效學(xué)實驗
??1. 實驗分組及處理
??2. 采用戊酸雌二醇+催產(chǎn)素引起大鼠子宮收縮為痛經(jīng)模型。大鼠灌胃0.8mg/只/天（第1天和第10天），其它時間0.4mg/只/天，連續(xù)15天，第15天腹腔注射催產(chǎn)素2u/kg
??3. 一般行為觀察：精神狀態(tài)、活動度、體重、食量、死亡率等
??4. 扭體反應(yīng)發(fā)生率觀察：注射催產(chǎn)素后觀察30min扭體反應(yīng)發(fā)生率
??5. 療效觀察：各組模型大鼠子宮、卵巢精確稱重，計算子宮、卵巢指數(shù)
??6. 觀察對模型大鼠血液流變學(xué)的影響
IBD模型
??1. 造模前 1d 禁食 24h 不禁水稱重后，3%的戊巴比妥腹腔注射麻醉（或乙醚） 5%(W/V)的2，4，6-三硝基苯磺酸 （TNBS） 按 100mg/kg-150mg/kg（約等于TNBS 原液 0.4mL-0.6 mL，相當(dāng)于 200 g 大鼠 20 mg-30 mg ）
??2. 分別加入乙醇，體位為頭朝下，用聚丙烯管插入肛門上段4cm 注射器注入
??3. 再倒立1-5min左右，以防藥液溢出，每隔10d重復(fù)灌腸4次后可制成病鼠模型
??4. 采血前觀察SD大白鼠的情況，記錄大鼠外觀體征、行為活動、糞便的情況，記錄死亡情況，每天稱重
MTD實驗
??1. 動物稱重并標(biāo)記
??2. 計算相應(yīng)給藥體積：按需計算每只動物的給藥量，分為高中低3個梯度，并作記錄
??3. 給藥操作
??4. 給藥后觀察：在給藥時記錄給藥時間。連續(xù)觀察至少14天，觀察一般指標(biāo)（如動物外觀、行為、對刺激的反應(yīng)、分泌物、排泄物等）、動物死亡情況（死亡時間、瀕死前反應(yīng)等）、動物體重變化。記錄所有的死亡情況、出現(xiàn)的癥狀，以及癥狀起始的時間、嚴(yán)重程度、持續(xù)時間等
腎臟缺血再灌注
??1. 購買200g的SD大鼠，飼養(yǎng)一周，分組
??2. 根據(jù)體重注射相應(yīng)劑量的水合氯醛，麻醉后進行手術(shù)
??3. 打開腹腔，鈍性分離腎動脈，然后用動脈夾夾閉腎臟動脈30-45min，根據(jù)實驗者的設(shè)計執(zhí)行
??4. 然后去除動脈夾，腎臟再次流入動脈血，腎臟由紫黑重新變?yōu)轷r紅色
??5. 然后根據(jù)實驗要求取材
成年營養(yǎng)性肥胖大鼠模型
??1. 購買體重200g的雄性SD大鼠
??2. 方法 :用高脂 高糖飼料喂養(yǎng)成年大鼠四至八周
??3. 觀察大鼠體重及Lee’s指數(shù)、腹腔內(nèi)脂肪重量及脂肪系數(shù)、葡萄糖耐量、血脂、血糖及血胰島素水平 ,并算出胰島素敏感性指數(shù)等
轉(zhuǎn)基因小鼠篩選——鼠尾提取基因組DNA方法
??1. 小鼠分籠后打耳標(biāo)，剪取小鼠尾尖3mm-5mm左右于1.5mL 離心管中，標(biāo)記耳標(biāo)號
??2. 配置消化液(SSTE)，每管加入消化液0.5mL，蛋白酶K 1-5 μL， 55℃，3-5h,或放置過夜。（最長可放置3天）
??3. 加1倍體積（0.5mL）PCI(下層液體)，上下顛倒10余次。（PCI可分裝出一些現(xiàn)用，以免操作不慎污染）
??4. 室溫15000rpm離心，10min
??5. 取上清約0.4mL入新管，依次標(biāo)號，加入異丙醇0.4mL ，4℃，15000rpm離心，5min
??6. 棄上清，濾紙吸干，加入70%乙醇0.5mL，將管底沉淀彈起，上下顛倒幾次，洗滌
??7. 4℃，15000rpm離心，5-7min
??8. 棄上清，瞬時離心，用槍吸干剩余液體，后經(jīng)空氣干燥5-10min
??9. 加入1*TE 60-170μL一般加100μL，振蕩30min溶解，于4℃冰箱保存
