在ELISA實(shí)驗(yàn)中，洗刷是關(guān)鍵過(guò)程之一。而有一些參數(shù)會(huì)影響洗刷過(guò)程的作用，這些參數(shù)包括吸液高度和吸入方位，這兩者都能調(diào)整，以下降背景(殘留量)和差異。下面咱們就一起來(lái)看看今日的重點(diǎn)內(nèi)容，公司與您初夏談?wù)fELISA抽吸的操作技巧。
殘留液體中包括未結(jié)合的抗原或抗體，它們會(huì)添加背景信號(hào)。殘留量越小，殘留液體越少，轉(zhuǎn)移到下一步的攪擾液體也就越少。吸液高度會(huì)顯著影響殘留量；假如洗刷吸頭與反響孔底部的距離稍大，那就會(huì)讓殘留量急劇添加。反之，假如洗刷吸頭壓著反響孔底部，那么也會(huì)使吸液效率下降，殘留量添加。
目前的洗板機(jī)一般運(yùn)用兩種類(lèi)型的洗頭：剛性和起浮的。起浮洗頭中的吸頭可在洗刷過(guò)程中自在上下移動(dòng)，而剛性洗頭則固定在恰當(dāng)?shù)姆轿弧＿\(yùn)用剛性洗頭的洗刷操作在優(yōu)化起來(lái)更為復(fù)雜，由于你需求十分細(xì)心地調(diào)整吸液高度。假如你們實(shí)驗(yàn)室運(yùn)用幾種不同的板，那可能會(huì)很耗時(shí)。在運(yùn)用起浮洗頭時(shí)，吸頭會(huì)降到反響孔的底部。調(diào)整高度就不是很重要，因而洗頭會(huì)下降到底部。
抽吸的方位也對(duì)殘留量有著重要影響；假如每個(gè)孔只運(yùn)用一個(gè)抽吸點(diǎn)(這很常見(jiàn)，由于更快)，那么抽吸的方位需求優(yōu)化。zui佳的方位取決于洗頭的性狀，但它幾乎不在反響孔的中心，即便這是所有洗頭zui常見(jiàn)的默許方位。一般來(lái)說(shuō)，zui佳方位在孔中心與孔壁之間的某處。
反響孔的形狀也會(huì)影響殘留量。C形底(平底圓角)的微孔板一般會(huì)比那些平底尖角的微孔板殘留量更低。
假如沒(méi)有自動(dòng)洗板機(jī)，采用手藝洗刷，那么也需求留意幾點(diǎn)。運(yùn)用8道或12道微量移液器，采用倒吸的辦法進(jìn)行洗刷；不同廠家的洗液不宜彼此混用。洗板時(shí)需確保微孔板平放，將洗刷液注滿各孔，但盡量避免漏液溢液，以每孔300 μl為宜；板洗次數(shù)一般為3次，要確保洗板的浸泡時(shí)刻，每次浸泡時(shí)刻一般為30-60 秒；盡量削減洗液殘留量，推薦每次洗板后進(jìn)行決定，并及時(shí)替換吸水紙，避免吸水紙的碎屑粘到反響孔內(nèi)。
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