試驗人員的無菌準(zhǔn)備:
1.肥皂洗手。
2.穿好阻隔衣、帶好阻隔帽、口罩、放好拖鞋
3.用75%酒精棉球擦凈雙手。
無菌操作的演示:
1.但凡帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培育基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精
擦洗瓶子的外外表
2.接近酒精燈火焰操作。
3.器皿運用前必須過火滅菌
4.繼續(xù)運用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處,運用時仍要過火。
5.各種操作要接近酒精燈,動作要輕、準(zhǔn)確,不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。
6.吸取兩種以上的運用液時要注意更換吸管,防止交叉污染。
準(zhǔn)備室的設(shè)備:
單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品規(guī)(放置消毒過的物品)、包裝臺。配液室的設(shè)備:扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(丈量培育用液PH值)、磁力攪拌器(裝備溶液室攪拌溶液)。培育室的設(shè)備:
液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器體系、低溫冰箱(-80℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫試驗記載)。必須放在無菌間的設(shè)備:離心機(搜集細(xì)胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培育物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、4℃冰箱(放置serum和培育用液)。無菌室的滅菌:
1.定時清掃無菌室:每周清掃一次,先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等,然后用3‰來蘇爾或許新潔爾滅或許0.5%過氧乙酸擦洗。2.CO2孵箱(培育箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦洗,然后用75%酒精擦洗或許0.5%過氧乙酸,再用紫外燈照耀
3.試驗前滅菌:打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器體系各20-30分鐘
4.試驗后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦洗超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺。