掃描電鏡

在光學(xué)顯微鏡下小于0.2mm的一些細(xì)微結(jié)構(gòu)，即便是再提高放大倍數(shù)也無(wú)法看清，這些結(jié)構(gòu)稱為亞顯微結(jié)構(gòu)或超微結(jié)構(gòu)。要想看清這些結(jié)構(gòu)，就必須選擇波長(zhǎng)更短的光源，以提高顯微鏡的分辨率。目前掃描電鏡的分辨力為6~10nm，掃描電鏡的最大有效放大倍率為0.2mm/10nm=20000X。 樣品制備簡(jiǎn)單，放大倍數(shù)大，分辨率高，場(chǎng)景深，圖像立體感豐富，易于識(shí)別和解釋，廣泛應(yīng)用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。

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實(shí)驗(yàn)步驟：

1. 清洗：一般用pH7.2磷酸鹽緩沖

2. 固定：常規(guī)法用2.5﹪戊二醛前固定24h（放入0－4℃冰箱中）即可。一些特殊樣品，如幼嫩的、含水量高的樣品最好還是用四氧化鋨后固定2h

3. 脫水：乙醇系列30﹪－50﹪－70﹪－85﹪－95﹪－100﹪（2次）逐級(jí)脫水，每級(jí)10-15min，塊大的應(yīng)適當(dāng)搖動(dòng)，保證脫水干凈

4. 中間液代換：分兩步。第一步用醋酸(異)戊酯：乙醇＝1：1的混合液浸泡10min，第二步用醋酸異戊酯浸泡10min，適當(dāng)搖動(dòng)

5. 臨界點(diǎn)干燥：代換后的樣品轉(zhuǎn)入樣品籃中，放進(jìn)預(yù)冷的臨界點(diǎn)干燥儀樣品室內(nèi)，蓋好室蓋后注入液體二氧化碳，以淹沒(méi)樣品為準(zhǔn)，先升溫至15℃加熱10min，再升溫至35℃讓其氣化，觀察液體全氣化后慢慢放氣，必須待氣放盡才能開(kāi)蓋取樣

6. 粘貼樣品：一般樣品可用雙面膠帶粘貼，如果樣品塊大，導(dǎo)電性差，必須用導(dǎo)電膠粘貼

7. 鍍膜后入鏡觀察

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我們提供：

1. 每個(gè)樣本提供兩張照片

2. 提供具體的實(shí)驗(yàn)方法、步驟、所用試劑、儀器，實(shí)驗(yàn)結(jié)果將以電子或書(shū)面形式提交給您

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1. 組織修成最大寬度不超過(guò)2cm大小

2. 提供組織相關(guān)信息，拍照要求，參考文獻(xiàn)