在ELISA實驗中,不同的檢測標本的制備方法也不同,接下來,酶聯生物總結下常見的集中標本的制備方法,僅供大家參考:
制備:
檢測可溶性蛋白: 根據產品說明書制備血清、血漿標本,由于有些樣品對溫度敏感極易喪失活性,應盡快分離并分裝(一般300~ 500ul/管),大多數標本收集和實驗在同一天應貯存在2~8C。若無法立即測定,應貯存在-70C,標本貯存時間一不宜過長,避免反復凍融。使用前將標本平衡至室溫,融化標本嚴禁使用水浴鍋。凍存后或冷藏時間過長的標本可能會出現沉淀或小凝集塊,應在實驗前離心或過濾(0.45um濾膜)標本,體積少的標本不建議過濾。所有標本的收集要使用無菌管,在無菌/半無菌條件下操作防止污染。
血清: 將血液在室溫凝集10~15分鐘,1500g離心20~30分鐘,小心吸取血清。
血漿: 按試劑盒中的說明書選擇抗凝劑。收集血液時,輕輕搖動試管使抗凝劑與血液充分混合。將血液在室溫保存10~ 15分鐘,1500g離心15~20分鐘,小心吸上層血漿。
尿液: 將尿液收集在無菌的容器內。1500g離心10~15分鐘或過濾(0.45um濾膜 )去除雜質。注意:對于尿液標本實驗的回歸系數可能發生變化。
細胞培養上清液: 1500g離心10~15分鐘去除細胞和細胞殘渣。若使用常規典型的培養基,應制備兩條標準曲線,-條使用標準品稀釋液/或實驗緩沖液配制標準品,另一條以細胞培養基配制標準品。若兩條標準曲線的變化范圍在10%內,實驗結果可用任一曲線分析。
檢測細胞相關和細胞內蛋白: 細胞相關蛋白和其它細胞內蛋白在ELISA實驗前需要對標本進行處理將目的蛋白釋放出來。
以上是上海酶聯生物為你講述:ELISA實驗標本的實驗制備。上海酶聯生物以解決您的問題為己任,不斷完善自身,提高企業文化,以便更好的服務于科研事業,歡迎您的咨詢來電。