保溫的方式除有的ELISA試劑盒儀器附有特制的電熱塊外,一般均選用水浴,可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度敏捷平衡。
ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上產生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的時機,靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的進程,因此需經擴散才能到達反響的結尾。在這以后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也相同如此。這就是為什么ELISA反響總是需求必定時刻的溫育。
在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響,即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反響的完結需求有必定的溫度和時刻,這一保溫進程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當。為防止蒸騰,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此刻可讓反響板漂浮在水面上。
ELISA試劑盒試驗水浴保溫辦法:
1、可將ELISA試板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度敏捷平衡。
2、為防止蒸騰,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,可讓反響板漂浮在水面上。
3、濕盒應先放在保溫箱中預溫至規則的溫度,特別是在氣溫較低的時分更應如此。
4、操作時的室溫應嚴厲約束在規則的范圍內,規范室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。
5、若用保溫箱,應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性杰出的資料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,將ELISA板放在濕紗布上。
6、室溫溫育時,只要平置于操作臺上即可。
7、無論是水浴還是濕盒溫育,反響板均不宜疊放,以確保各板的溫度都能敏捷平衡。
8、應注意溫育的溫度和時刻應按規則力求。
9、為確保這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板一起測定。
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