elisa試劑盒實驗操作步驟多,新手操作難免會有過失。而這些過失很多是由細節不夠好造成的,減少過失的方法有很多,比如做實驗時少說話,防止唾液掉進酶標條中。當然,大家還要學會自己發掘問題,找出原因。那么我們要如何完善elisa試劑盒實驗中的過失?
1:評估試劑的實用性,試劑的穩定與否,對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗,判定試劑符合要求后方可使用。
2:操作前仔細閱讀說明書,嚴格按照說明書要求進行規范化操作。不同批號的試劑不可混用.值得改進的地方,反復試驗確定成立后才能改進,比如洗板次數的掌握等。
3:加樣要準確、快速。加樣不準確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結果.另外,顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止沛的最有關,所以加樣應慎重。要求在一一定時間內加樣完畢的實驗 ,如果加樣遲緩,便出現誤差,而且試劑長時間暴露在外,尤其室溫過
線咨詢呆存期會縮短甚至失效。
4.檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作實驗儀器、器械,具有- -定總結和分析問題的能力,對實驗中山觀的意外情況能及時妥善解決。
5:使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。
6:嚴格掌握顯色時間,顯色時間過短,加入終止液反應終止后,底物結合物的量過少,易出現假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應判為假陽性,這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結果。
7:洗滌徹底,洗板不徹底,酶結合物本底顯色會呈現假陽性。另外,洗滌液要新鮮,現用現配,陳舊的洗滌液會出現本底增高現象,也可能出現假陽性。
8:嚴控反應時間。反應時間過長,酶失活;反應時間過短,酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合,生成物結構松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。
固,容易洗掉,都可能造成假陰性。
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以上是如何完善elisa試劑盒實驗中的過失,大家了解了嗎?