RNA提取試劑盒用于從細胞、組織、新鮮血液和病毒中提取200bp及以下的smallRNA,用LB10裂解樣品后,加入氯仿,溶液分為無色水相和粉紅色有機相,RNA在水相中,用RNA硅膠膜離心柱特異地吸附水相中的大分子量RNA(28SrRNA,18SrRNA,mRNA),流出液中的smallRNA用miRNA硅膠膜離心柱特異地吸附。與其它miRNA提取方法相比,該試劑盒裂解能力強、提取量高、專一性強,應用范圍廣。
5、將上清水相轉入新的離心管中,加入0.5倍上清水相體積的無水乙醇,立即吹打混勻。(不要吸取、沉淀物和漂浮物。漂浮物可能會黏附在槍頭的外壁,注意不能將其帶入離心管中。)
9、重復步驟8一次。
10、將吸附柱RA放回收集管中,13,000rpm離心2分鐘,盡量除去漂洗液,以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應。
11、取出吸附柱RA(避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的廢液),放入新的RNase-free離心管中,在吸附膜的中間部位加50~80μlRNase-freeH2O,室溫靜置2分鐘,12,000rpm離心1分鐘。洗脫后的RNA可立即使用或保存在-80°C。
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