酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)是目前臨床實(shí)驗(yàn)室檢測免疫學(xué)指標(biāo)、應(yīng)用范圍泛的方法之一，廣泛應(yīng)用于乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病以及結(jié)核等傳染類疾病的診斷及激素的檢測，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速簡便、重復(fù)性好、成本低、環(huán)保且適合大批量人群篩查等優(yōu)點(diǎn)。
ELISA試劑盒進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇包括:
(1) 固相載體的選擇:不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選，用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好，吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間，吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4C18~24小時。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)，然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。

(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。

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