Rat ADAM9 ELISA Kit樣品收集方法：
1：血清：全血樣品于室溫放置1小時(shí)或2-8℃過夜后于2-8℃，1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測。
2：血漿：抗凝劑推薦使用EDTA-Na2，樣品采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃，1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。
3：組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比，比如1 g的組織樣品對應(yīng)9 mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中，在冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行反復(fù)凍融或超聲破碎。最后將勻漿液于2-8℃，5000×g離心5-10分鐘，取上清檢測。
4：細(xì)胞提取液：貼壁 細(xì)胞用冷的PBS輕輕清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g離心5分鐘后收集細(xì)胞；懸浮細(xì)胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的PBS洗滌3次。每106個(gè)細(xì)胞中加入150-200 μL PBS重懸(推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑；若含量很低可減少PBS的體積)并通過反復(fù)凍融或超聲使細(xì)胞破碎。
將提取液于2-8℃，1500×g離心10分鐘，取上清檢測。

5：細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他生物體液：收集液體后于2-8℃，1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。

Rat ADAM9 ELISA Kit本試劑盒采用雙抗體夾心SP-ELISA方法:將特異性的捕獲抗體包被于高親和力的酶標(biāo)板上，酶標(biāo)板中對應(yīng)加入標(biāo)準(zhǔn)品及待測樣品，樣品及標(biāo)準(zhǔn)品中的靶蛋白被捕獲，生物素化的檢測抗體與靶蛋白結(jié)合， SP復(fù)合物與生物素化檢測抗體結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，檢測過程中每一步經(jīng)過洗滌液的徹底洗滌，游離的成分均被洗去，用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的作用下，若反應(yīng)孔中有靶蛋白則顯藍(lán)色，加入終止液后變黃色，用酶標(biāo)儀在450 nm處測OD值，靶蛋白濃度與OD值之間呈正比，根據(jù)OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中靶蛋白的含量，進(jìn)而對檢測的樣品進(jìn)行定性/相對定量的統(tǒng)計(jì)分析。