實驗原理實驗
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠尿素氮(BUN)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠尿素氮(BUN)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法
1)血清 操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后1000×g 離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2)血漿 EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g 離心 30 分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液 1000×g 離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿 將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g 離心 10 分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在 37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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