呋喃妥因檢測卡使用說明書

                                                         （膠體金法）

 

1 原理及用途

本產品應用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成，用于檢測蜂蜜、組織、肝臟等樣本中的呋喃妥因代謝物（AHD）。

樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后，樣本溶液中的呋喃妥因代謝物與金標抗體相結合，從而阻止金標抗體與纖維素膜上呋喃妥因偶聯物結合。當樣本溶液中的呋喃妥因代謝物含量大于檢測限時檢測線不顯色（或顯色比對照線淺），結果為陽性；當樣本溶液中呋喃妥因代謝物含量小于檢測限時檢測線顯紫紅色（顯色與對照線一致或更深），結果為陰性。

2 技術指標

2.1 試劑卡靈敏度：1ppb（ng/ml）

    對樣本的最終檢測限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。

2.2 樣本檢測下限：

蜂蜜、組織、腸衣、肝臟………………………0.5ppb

3 試劑盒組成

檢測卡……………………50個/盒

樣本復溶液……………………1瓶

衍生化試劑……………………1瓶

說明書…………………………1份

4 需要的器材和試劑

4.1 儀器：均質器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平（感量0.01g）

4.2 微量移液器：單道20μl-200μl，100μl-1000μl

4.3試劑：乙酸乙酯、正己烷、氫氧化鈉、濃HCl、K2HPO4·3H2O

5 樣本前處理

5.1 樣本處理前須知：

實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實驗結果。

5.2 配液：

配液1：0.1M  K2HPO4 溶液

    稱11.4g K2HPO4?3H2O加去離子水溶解定溶至500ml。

配液2：1M  HCL 

    8.6mL濃HCL加去離子水定容至100mL。

配液3：1M  NaOH溶液

    稱取4g NaOH，加去離子水定容至100ml

5.3蜂蜜、組織、腸衣、肝臟樣本處理方法

1）稱取2±0.05g均質樣本于離心管中，加入4m去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑，振蕩5分鐘；

2）在37℃過夜孵育(約16小時)或50℃（超過50℃時會影響分層效果）水浴孵育3小時；

3）分別加入5ml 0.1M K2HPO4 溶液，0.4ml 1M NaOH溶液和5ml的乙酸乙酯，振蕩5分鐘；

4）室溫下4000轉/分，離心10分鐘；

5）取出2.5ml的上層液到另一個離心管中，50-60℃氮氣或空氣吹干；

6）用1ml正已烷溶解殘留物，加入0.5ml復溶液充分振蕩混合30秒；室溫4000轉/分，離心10分鐘；

7）上層為正已烷，取下層樣本液用于分析。

濃縮倍數為：2    檢測下限：0.5ppb

6 實驗步驟

6.1 撕開檢測卡鋁箔包裝袋，取出檢測卡，放于平整、潔凈的臺面上。

6.2 用配套吸管吸取已準備好的樣本液體，緩慢、逐滴的（應避免泡沫產生）滴加2-3滴（約60ul）到加樣孔（S）內。

6.3 室溫下放置3-5分鐘判斷結果, 其他時間判讀無效。

7 結果判斷

陰性（-）：C線顯紅色，T線比C線顯色深或者一樣深，表示樣本中呋喃妥因濃度低于檢測下限，或不含有。

陽性（+）：C線顯紅色，T線比C線顯色淺或者不顯色，則表示樣本中呋喃妥因濃度高于檢測下限。

無效：未出現質控C線，表明操作過程不正確或檢測卡已失效。

8 注意事項

8.1 過期或鋁箔袋破損的產品，均不可使用。

8.2 檢測卡從冰箱中取出時應恢復到室溫后打開，打開的檢測卡應盡快使用以免受潮后失效。

8.3 不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。

8.4 取液滴管不可混用，以免交叉污染。

8.5 待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細菌污染，否則容易導致阻塞、顯色不明顯等異?，F象，從而影響實驗結果的判定。

9 貯藏及保存期

儲藏條件：試劑盒于2-30℃干燥環境下保存。

保 質 期：該產品有效期為1年，生產日期見包裝盒。

【生產企業】

企業名稱：上海酶聯生物科技有限公司

地    址： 上海市閔行區元江路5500號

電    話：4008-898-798  ，021-61725725  

傳    真：021-54795560

郵    編：200070              

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