摘要
流式細胞術檢測細胞DNA含量,通過染色定量分析DNA,亦可通過熒光顯微鏡觀察形態(tài)變化。
流式細胞術檢測細胞DNA含量,通過染色定量分析DNA,亦可通過熒光顯微鏡觀察形態(tài)變化。AO(Acridine? Orange)在低濃度下與DNA結合較佳,工作濃度8.5ug/ml
產(chǎn)品介紹
AO染色液(1mg/ml)
產(chǎn)品簡介：
Acridine Orange屬于三環(huán)雜芳香燃料，可以標記DNA、RNA，屬于異染性熒光染料。
該染料具有膜通透性，能透過細胞膜，使核
DNA和RNA染色。
因此
AO常用于細胞內DNA和RNA進行檢測。AO與核酸結合方式主要有：1、插入性結合，AO嵌入核酸雙鏈的堿基對之間，這種結合方式主要為AO與DNA的結合，其熒光發(fā)射峰為530nm，激發(fā)后呈綠色熒光；2、靜電吸引，帶正電荷的AO與單鏈核酸的磷酸根(帶負電荷)產(chǎn)生靜電間的吸引結合，這種結合方式主要為AO與RNA的結合，其熒光發(fā)射峰為640nm，激發(fā)后呈紅色熒光，少量結合會
呈桔黃色或桔紅色熒光
。因此，吖啶橙
嵌合到雙鏈
DNA分子中顯綠色，與DNA單鏈或RNA結合時發(fā)桔黃色或橙紅色熒光。
AO
染色液
(1mg/ml)為儲存液，使用時應稀釋到合適濃度后使用。染色后在熒光顯微鏡下觀察，
AO
可透過正常細胞膜，使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細胞中，因染色質固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體。
AO
使其染上致密濃染的黃綠色熒光或黃綠色碎片顆粒；而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。
AO
染色常與
EB染色合用雙染，因EB只染死細胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光，由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。
