微量法:100T/48S
注? ?意 :正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動(dòng)物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān),能夠反映腸道機(jī)械屏障的完整性和受損傷程度。
測(cè)定原理:
DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過(guò)氧化氫,外源添加過(guò)量的辣根過(guò)氧化物酶,催化過(guò)氧化氫氧化鄰聯(lián)茴香胺生成氧化型鄰聯(lián)茴香胺,在460nm處有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定該波長(zhǎng)吸光度增加速率,計(jì)算DAO活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。