分光光度法：50管/48樣

注?意：正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定?

測定意義：

海藻糖是由兩個葡萄糖分子以α，α-1-1 糖苷鍵連接而成的一種非還原雙糖，廣泛存在于細(xì)菌、酵母菌、霉菌、食用菌、低等植物、昆蟲、無脊椎動物和高等植物等多種有機(jī)體中。海藻糖的非還原性決定了它對酸、堿、高溫等的穩(wěn)定性。另外，它本身具有很強(qiáng)的吸水性，使它在生物體內(nèi)具有抗脫水作用，在逆境條件下可通過識別外界刺激、產(chǎn)生和傳遞信號、基因表達(dá)和代謝調(diào)節(jié)來保護(hù)植物免受不良環(huán)境的傷害。

植物體內(nèi)主要以葡萄糖為底物合成海藻糖，該反應(yīng)首先在海藻糖-6-磷酸合成酶（trehalose-6-phosphate synthase，TPS）的作用下，催化尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）和 6-磷酸葡萄糖反應(yīng)生成中間產(chǎn)物6-磷酸海藻糖，再在海藻糖-6-磷酸磷酸酶 （trehalose6-phosphate phosphatase，TPP）的作用下去磷酸化，生成海藻糖。因此，測定TPS活性對于研究植物逆境具有重要意義。

測定原理：

TPS 催化 UDPG 與 G6P 生成海藻糖-6-磷酸，同時產(chǎn)生 UDP；UDP 在丙酮酸激酶與乳酸脫氫酶作用下，氧化 NADH 為 NAD+，NADH 的下降速率與 UDP 含量成正比，通過 340nm 吸光度下降速率反映 TPS 活性。

需自備的儀器和用品：

分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。