腺苷脫氨酶(ADA)活性測(cè)定試劑盒分光法/48樣
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
腺苷脫氨酶（ADA，EC 3.5.4.4）是一種琉基酶，是嘌呤核苷酸代謝的關(guān)鍵酶，與機(jī)體細(xì)胞的免疫活性有重要關(guān)系。腺苷脫氨酶（ADA）催化腺嘌呤核苷水解，產(chǎn)生次黃嘌呤核苷和氨，利用氨在強(qiáng)堿的環(huán)境下與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍(lán)，溶液顏色穩(wěn)定。其在 630nm 處有特征吸收峰，通過(guò)檢測(cè)氨增加的速率，即可計(jì)算該酶活性大小。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、研缽、冰和蒸餾水。
腺苷脫氨酶(ADA)活性測(cè)定:
1、樣本制備：
① 組織樣本：
稱取約 0.1g 組織（水分足的樣本可取 0.2-0.5g），加入 1mL 提取液；進(jìn)行冰浴勻漿。12000rpm，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
[注]：也可以按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例提取。
② 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。
2、上機(jī)檢測(cè)：
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過(guò)程：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品母液（10μg/mL 的氨（分子量是 18）），把母液用蒸餾水稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 2, 4, 6, 8, 10 μg/mL。也可根據(jù)實(shí)際樣本來(lái)調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。
2. 按照顯色反應(yīng)階段的測(cè)定管加樣體系操作，根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過(guò)程：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品母液（10μg/mL 的氨（分子量是 18）），把母液用蒸餾水稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 2, 4, 6, 8, 10 μg/mL。也可根據(jù)實(shí)際樣本來(lái)調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。
2. 按照顯色反應(yīng)階段的測(cè)定管加樣體系操作，根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
