腺苷脫氨酶(ADA)活性測定試劑盒微板法/96樣
產品簡介:
腺苷脫氨酶(ADA,EC 3.5.4.4)是一種琉基酶,是嘌呤核苷酸代謝的關鍵酶,與機體細胞的免疫活性有重要關系。腺苷脫氨酶(ADA)催化腺嘌呤核苷水解,產生次黃嘌呤核苷和氨,利用氨在強堿的環境下與次氯酸鹽和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚藍,溶液顏色穩定。其在 630nm 處有特征吸收峰,通過檢測氨增加的速率,即可計算該酶活性大小。
所需的儀器和用品:
酶標儀、96 孔板、臺式離心機、可調式移液槍、研缽、冰和蒸餾水。
腺苷脫氨酶(ADA)活性測定:
1、樣本制備:
① 組織樣本:稱取約 0.1g 組織(水分足的樣本可取 0.2-0.5g),加入 1mL 提取液;進行冰浴勻漿。12000rpm,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
酶標儀、96 孔板、臺式離心機、可調式移液槍、研缽、冰和蒸餾水。
腺苷脫氨酶(ADA)活性測定:
1、樣本制備:
① 組織樣本:稱取約 0.1g 組織(水分足的樣本可取 0.2-0.5g),加入 1mL 提取液;進行冰浴勻漿。12000rpm,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
[注]:也可以按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例提取。
② 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
標準曲線制作過程:
1 標準品母液(10μg/mL 的氨(分子量是 18)),把母液用蒸餾水稀釋成以下濃度梯度的標準品:0, 2, 4, 6, 8, 10 μg/mL。也可根據實際樣本來調整標準品濃度。
2 按照顯色反應階段的測定管加樣體系操作,根據結果即可制作標準曲線。