Elisa試劑盒檢測方法·雙抗體夾心法
1.將抗體包被在固相載體上。
2.如樣品中含有抗原,則結合為抗原抗體復合物。
3.再加入酶標記抗體,則結合為抗體-抗原-酶標記抗體復合物。
4.酶催化底物并顯色。雙抗體夾心法原理圖
·雙抗原夾心法
1.將抗原包被在固相載體上。
2.如樣品中含有抗體,則結合為抗原抗體復合物。
3.再加入酶標記抗原,則結合為抗原-抗體-酶標記抗原復合物。
4.酶催化底物并顯色。雙抗原夾心法原理圖
提示:
雙抗夾心法常用于抗原、蛋白等檢測。
配對抗體3種形式:
①只有一個多抗
優點:成本低,耗時短。
缺點:靈敏度低,成功率低。
②一個多抗(包被),一個單抗(酶標記)
優點:成本適中,耗時適中(4-6個月),成功率較只有一個多抗高。
缺點:穩定性一般。
③單克隆抗體
優點:靈敏度高,穩定性好。
缺點:耗時久(6-8個月),成本高。
競爭法
以測小分子抗原為例,為標本中的小分子抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結合。標本中小分子抗原量越多,結合在固相上的酶標抗原愈少,因此陽性反應呈色淺于陰性反應。
提示:
競爭法常用于小分子、lgA、lgG、lgM等檢測。
Elisa試劑盒間接法
間接法是檢測抗體最常用的方法,其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相抗原結合的受檢抗體,故稱為間接法。